Détermination mort cellulaire

Pour déterminer le type de mort cellulaire on essaie de détecter la présence de phosphatidylsérines sur la membrane (avec l'annexin et une molécule fluorescente).

Mais dans le cas de manipulation in vitro la membrane est de toute façon lisée. C'était quoi l'astuce pour déterminer si on est dans une mort par nécrose ou apoptose?

Tu peut voir si ta cellule exprime trop de caspase? (c'est une hypothèse)...

J'avais noté une enroule avec la fluoresence...

Yo! ché pas si tu verra ce message masi voila comment ca marche:

Tu c que la phosphatidilserine se trouve toujours ds la membane interne mais du à l'apopotose la flippase se deregle et elle commence a envoyer des phosphatidilserine meme dans la membrane externe...Donc ce que tu fait c'est que tu couple de la fluorescence à de l'annexine5 (qui se lie tres bien à la serine) et qd tu l'injecte à ta cellule et que tu vois que l'ennexine fluorescente se trouve bcp dans la membrane externe c'est que ta cellule est entrain de faire ses adieux...

Voila!! desolé pr le retard...

Et donc pour differencier si c par apopstose ou necrose on doit verifier si la membrane plasmique est intacte ou pas et qui'il n y ai pas de trou pour que l'annexine passe donc les proteines fluorescentes qu'on prend n'ont pas la possibilié de traverser la membrane plasmique (même si elle est troué)

C'est tout ce que le prof a dit sur ce truc!!

Mais il avait ajouté que si tu travaille en in vitro, ta membrane est de toute façon lysée que se soit nécrose ou apoptose... donc y'avait une autre astuce

si tu as apoptose le rouge aparraissait après le vert sur sa vidéo =)

TimPeteloup a écrit:Mais il avait ajouté que si tu travaille en in vitro, ta membrane est de toute façon lysée que se soit nécrose ou apoptose... donc y'avait une autre astuce

La je séche completement...g rien noté =D

tu dois jouer sur le caractere hydrophile de tes elelements fluorescent!!