Expérience Brener, Jacob, Meselson ; coiffe 5' >< queue poly-A

Bonjour,

est-ce que quelqu'un pourrait me réexpliquer comment marche l'expérience de Brener, Jacob, Meselson?

Est-ce que quelqu'un pourrait me reexpliquer quel est la différence entre la coiffe en 5' et la queue poly-A? A quoi ça sert concrètement? Quel sont leurs fonction?

Merci.. :=)

La queue poly-A est une longue (quelques centaines) séquence d'adénosines à l'extrémité 3' d'un ARN messager.
La coiffe 5' est un nucléotide modifié (la 7-méthylguanosine) lié l'extrémité 5' d'un ARN messager par 3 phosphates.

Image ici : http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/b/b4/Cap_Structure.svg

Ces ajouts (qui se font après la transcription) permettent de protéger l'ARNm de la dégradation (la coiffe par exemple bloque l'action des exonucléases 5' -> 3') et permettent aussi la traduction de l'ARNm (ils permettent à l'ARNm d'avoir une forme de cercle et de "recruter" un ribosome -> cf cette magnifique vidéo où on voit une traduction en 1'35'')

Pour plus d'infos :
http://fr.wikipedia.org/wiki/Coiffe_%28biologie%29
http://fr.wikipedia.org/wiki/Polyad%C3%A9nylation


L'expérience de Brenner (apparemment il y a une faute dans les slides), Jacob et Meselson :

On veut savoir si les ribosomes contiennent l'information génétique pour synthétiser leurs protéines ou si ils ne font que suivre les plans d'un messager.

Pour trancher, B,J&M ont cultivé des bactéries sur dans un milieu contenant des isotopes lourds (N15 et C13). Les ribosomes bactériens sont donc "lourds".
Ils les ont ensuite infectés avec des phages T4 qui détruisent l'ADN bactérien et le remplacent par de l'ADN viral. En même temps, les cellules sont transférées dans un milieu contenant des isotopes légers (N14 et C12).
Ils ont également rajouté de l'uracile radioactive pour voir si du nouvel ARN allait être synthétisé.

Si c'est les ribosomes qui contiennent l'information nécessaire à la synthèse des protéines, la bactérie devrait synthétiser des nouveaux ribosomes viraux (vu qu'on est maintenant dans un milieu léger, ces nouveaux ribosomes seraient eux aussi légers) pour synthétiser des protéines virales.
Si l'information passe par un messager, la cellule peut utiliser les ribosomes lourds déjà présents pour la synthèse.

Après lyse des bactéries et centrifugation, on trouve que des ribosomes lourds : les bactéries n'ont donc pas synthétisé de nouveaux ribosomes et ont utilisé les ribosomes bactériens pour faire des protéines virales, ce qui implique la présence d'un messager. (sans messager il aurait fallu faire de nouveaux ribosomes pour les protéines virales)

ils ont aussi trouvé de l'ARN radioactif (nouvellement synthétisé) associé avec les ribosomes bactériens qui pouvait s'hybrider (c.a.d se lier base par base) avec l'ADN viral.

Par cette expérience B,J&M ont donc démontré l'existence d'un messager qui apporte l'information génétique aux ribosomes, et ont découvert qu'il était fait d'ARN complémentaire avec l'ADN de la cellule.

(Grossièrement résumé de ce site, j'espère que je me suis gouré nulle part)

J'espère que c'est clair :-)