Phosphorylation d'eiF2

Salut j'avais qq questions concernant le cours de tantôt...

1°) Lorsqu'on veut démontrer que la phosphorylation d'eiF2 induit la formation de granules, pourquoi on ajoute la beta-galactosidase? De même, à quoi sert le premier cas? Et pour les mutants de eIF2, ce qu'on fait c'est bien remplacé la sérine soit par une protéine qui ressemble à la sérine phosphorylée soit par une protéine qui ne peut être phosphorylée?

2°) eiF2 et eIF2 c'est bien la mmême chose?

merci beaucoup

romain a écrit: eiF2 et eIF2

oui c'est le Facteur d'Initiation e 2

Salut! je n'ai pas pris note sur ce slide mais j'ai regardé ça ce matin et je vais essayer de te répondre du mieux que je peux en te recomandant vivement de soumetre tout ça a ton librexamen!

1) La beta-galactosidase permet à priori de voir/selectionner les cellules qui ont bien été transfectées avec le vecteur d'expression de eIF2. C'est le marqueur. Ce que tu vois sur la photo c'est des amas de cellules normalement.

2) Pour les mutants tu as tout a fait raison, mais je préciserais peut-être qu'il n'y a qu'un seul acide aminé que l'on change dans eIF2:
- S51D veut dire que la sérine 51 a été remplacée par un Aspartate (D) et si j'ai bien compris les résultats, eIF2 reste alors phosphorylée constitutivement (le GDP ne reprend plus son phosphate?) donc formation de granules de stress (autrement dit blocage de la traduction?) et ceci, qu'il y ait arsenite (oxydante et donc stressante) ou non.
- S51A, A pour Alanine qui ne peut pas être phosphorylée, donc pas de granules.

voila! Ce weekend j'aurais la partie de Gueydan résumée en format doc pour les interressés!

merci bien

Avec plaisir!

Autre chose que j'ai oublié de préciser en relisant ta question: le premier cas est un contrôle pour verifier que l'apparition de granules ne se produit que en présence d'arsenite dans les conditions normales. Le vecteur d'expression est vide.